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德国Hawo650封口机使用说明书

  一、早期生物监测采用菌片式生物指示物,将芽孢接种于纸质菌片上,灭菌循环完成后需通过无菌技术转移至培养基中在合适的温度下进行培养,时间为7天,定期观察培养基的性状,出现浑浊则提示有芽孢存活。需要相同批号的未灭菌芽孢菌片和无菌培养基分别作为阳性对照和阴性对照进行培养。阳性对照培养结果应为阳性,提示培养程序和条件合格,芽孢在灭菌前存活;阴性对照培养结果应为阴性,提示培养操作的无菌技术要求符合标准,培养基灭菌合格。由于其培养过程复杂,技术要求高,周期长,容易污染和受外界影响而出现假性结果,目前在医院灭菌监测中很少应用。   


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△图为菌片


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△图为无菌培养操作


  二、20世纪70年代3M公司推出了自含式生物指示物,将细菌芽孢生长所需要的培养基与芽孢菌片放置于一个装置中,菌片和培养基安瓿灭菌前相互独立,灭菌暴露后挤碎安瓿,使芽孢与培养基充分接触并在适当的温度下培养,若芽孢未被完全灭活,芽孢生长会产生酸性代谢产物,培养基中所含的pH值敏感指示染料会变为黄色。自含式生物指示物可有效防止外界杂菌的污染,因此只需要做阳性对照,而且培养周期一般为24-48小时,但是因培养时间较长,已不能适应现代医疗机构越来越快器械周转的需求。

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△图为自含式生物指示物

  三、20世纪90年代,为适应消毒供应行业的迅速发展,3M公司推出具有里程碑意义的世界第一款快速阅读自含式生物指示物,将生物指示物的培养时间由48小时缩短到3-4小时。

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△图为快速生物指示物

之后3M持续引领生物指示物技术领域的发展,进一步优化快速阅读技术,于2013年率先在全球推出极速生物指示物,将培养时间进一步缩短到1小时,使生物指示物快速阅读技术的发展推动到前所未有的高度,成为业界的里程碑性事件。

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△图为极速生物指示物

极速生物指示物判读原理与快速生物指示物的判读原理相同,未完全灭活的芽孢在萌发过程中会产生α-葡萄糖苷酶,该酶可促进培养基中非荧光底物发生水解反应,生成具荧光活性的产物(4-MU)。专用的快速培养阅读器配有荧光检测系统,如果检测到特定强度的荧光信号,即判断培养结果为阳性。同时快速生物指示物也可提供48小时的pH变色指示功能。

图为荧光判读原理(以极速生物指示物为例)

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早在2008年美国医疗机构消毒和灭菌指南(Guideline for Disinfection and Sterilization in Healthcare Facilities)指出“快速生物指示物通过检测嗜热脂肪杆菌相关酶水解非荧光底物生成的荧光物质所发出的荧光得到生物监测结果,这一产品已经在市场上销售超过十年。研究表明,快速生物指示物的灵敏度与常规生物监测的灵敏度相同,快速生物指示物的可靠性和24、48小时以及7天培养的可靠性相同”。因此,使用培养阅读器培养时,当阅读器显示“+”或“-”(阳性/阴性)结果后,则不需要保留生物指示剂。培养阅读器显示的结果就是最终的结果,生物指示剂已经可以丢弃。

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